小鼠二酰基甘油(DAG)elisa试剂盒样本处理方法:
1. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
2. 细胞上清液:1000x g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
关于实验室中ELISA试剂盒的注意事项:适宜的温度:在建立ELISA方法作为反应动力学研究时,实验表明两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时产物的生成可达顶峰。为避免蒸发,板上应加盖也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应孔不已叠放,以确定各板的温度都能迅速平衡。应注意文娱的温度和时间应按规定力求准确。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果将质控放在非边缘位置。