犬胶原蛋白总量(collagen)elisa试剂盒常见问题解答：若实验效果不理想请及时对显色结果拍照。保留所用板条及未使用试剂，并妥善保存。问题可能原因解决方案如下：1） 不正确的样本收集和处理方法；建议采取正确的样本收集和处理方法2） 待测物质在样本中含量低；建议使用新鲜样本重复实验3） 没有加入终止液；建议严格按照说明书实验步骤加入终止液4） 酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物，颜色应迅速显现来检查5） 超过读数时间；建议在说明书推荐的读数内读数。（科研实验专用）操作步骤：步骤一：使用前将所有试剂平衡至室温并充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫以免加样时加入大量的气泡产生加样上的误差。步骤二：根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。步骤三：【加样】加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37摄氏度温育45分钟。步骤四：【洗涤】甩去孔内液体，每孔加满洗涤液振荡30秒，甩去洗涤液用吸水纸拍干。重复此操作4次，也可以用洗板机洗涤。步骤五：每孔加入100ul的HRP轻轻振荡混匀37摄氏度温育30分钟。步骤六：重复洗涤步骤。步骤七：每孔加入底物A、B溶液各50ul，轻轻振荡混匀，37摄氏度温育5分钟，避免光照。步骤八：取出酶标板迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。步骤九：在450nm波长处测定各孔的OD值。
