上海轩泽康生物小鼠巨噬细胞刺激蛋白(MSP) elisa试剂盒需自备的设备及试剂:
1)450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热);
2)单道或多道微量加液器及吸头;
3)稀释样品的EP管;
4)蒸馏水或去离子水;
5)吸水纸;
6)盛放洗液的容器
小鼠巨噬细胞刺激蛋白(MSP) elisa试剂盒操作步骤:
【标准品的加样】:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
【加样】:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
【加酶】:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
【温育】:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
【配液】:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
【洗涤】:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
【显色】:每孔先加入底物溶液A 50μl,再加入底物溶液B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
【终止】:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
【测定】:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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