小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALPB)elisa试剂盒操作流程如下：
1.【平衡试剂盒至常温】：取出实验过程中所需板条，剩余半条用自封袋密封放回4摄氏度。
2.【加样】：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。在样本孔先加样本10μl再加样本稀释液40μl，（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
3.【加酶】：标准品孔和样本孔总每孔加入酶标试剂100μl（辣根过氧化物酶标记的检测抗体）空白孔除外。
4.【温育】：用封板膜封住反应孔，37℃恒温箱温育60分钟。
5.【配液】：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6.【洗涤】：小心揭掉封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置60秒后甩去洗涤液，吸水纸上拍干。如此重复5次（也可用洗板机洗板）。
7.【显色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。
8. 【终止】：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9. 【测定】：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALPB)elisa试剂盒使用注意事项：1. 本试剂盒取出的试剂在室温条件下使用，溶液应轻轻摇匀后使用。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，这属于正常现象，加热使结晶完全溶解后再配制。2. 底物液使用前建议先行检查，若溶液颜色发蓝则已失效，弃去。3. 以上标准孔及待查样品均建议做复孔，每次测定应同时制作标准曲线。4. 本试剂盒含 2M 硫酸，不要将它与含叠氮化钠的废物混在一起。5. 板条开封后剩余板条要密封好，保持板条干燥。6. 不同批号的试剂盒组分不能混用。7.正确拿酶标板：不要接触板的底部，否则会影响度数。
