人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒样本的搜集及血清别离中要留心尽量避免细菌污染,一则细菌的成长,其所分泌的一些酶或许会对抗原抗体等蛋白发作分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定办法发作非特异性烦扰。血清标本如是以无菌操作别离,则可以在2~8℃下保存一周,ELISA试剂盒如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下;冰冻保存的血清标本须留心避免因停电等构成的重复冻融。ELISA试剂盒标本的重复冻融所发作的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发作损坏作用,然后引起假阴性成果。此外,冻融标本的混匀亦应留心,不要进行剧烈振动,重复倒置混匀即可。技术提示 :1、混合蛋白溶液时,避免起泡。 2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样, 避免交叉污染。 3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。 4、使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。 5、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。 6、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄 色。 7、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 8、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温 育操作。