猪糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒操作流程如下:【平衡试剂盒至常温】:取出实验过程中所需板条,剩余半条用自封袋密封放回4摄氏度。【加样】:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。在样本孔先加样本10μl再加样本稀释液40μl,(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)【加酶】:标准品孔和样本孔总每孔加入酶标试剂100μl(辣根过氧化物酶标记的检测抗体)空白孔除外。【温育】:用封板膜封住反应孔,37℃恒温箱温育60分钟。【配液】:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。【洗涤】:小心揭掉封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置60秒后甩去洗涤液,吸水纸上拍干。如此重复5次(也可用洗板机洗板)。【显色】:每孔先加入底物溶液A 50μl,再加入底物溶液B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光孵育15分钟。【终止】:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。【测定】:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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