猪颗粒酶M(GZMM) ELISA试剂盒使用指南:
步骤一:从冷藏环境中取出猪颗粒酶M(GZMM) ELISA试剂盒,室温放置30分钟以确保所有试剂稳定。
步骤二:根据待测样本数量决定所需的板条数,把剩余的板条密封放回冰箱。
步骤三:分别设置标准品孔、空白孔、待测样品孔(为避免实验误差,保证准确性,建议设置复孔)。
步骤四:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白孔中,空白对照孔加入50ul的蒸馏水。齐誉孔加入50ul的待测样本。
步骤五:标准品孔、待测样本孔各孔加入100ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
步骤六:酶标板用封板膜密封后放入湿盒于37℃恒温孵育1小时。
步骤七:洗板。用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15~30秒,充分清洗酶标板5次,用吸水纸拍干
步骤八:各孔分别加入底物A、底物B 50ul(不用吹打)
步骤九:37℃避光反应10-15分钟,加入50ul终止液
步骤十:在450nm波长读取各孔的OD值
本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责。请使用者在实验前有充分的计划,考虑样本的可能使用量,预留充足的样本(96T试剂盒,一般可检测90个样本,留6个孔做标准曲线;48T试剂盒可检测42个孔)实验开始前要预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释。使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2) 严格按照说明书步骤进行实验,不同批次的试剂不得混用。若样本为细胞培养上清,该类样本干扰因素较多:细胞状态、细胞数量、采样时间等。所以可能存在检测不出的情况。建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变异性导致实验结果偏差。