猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒操作步骤如下:
步骤一: | 从室温平衡60分钟后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 |
步骤二: | 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50ul。 |
步骤三: | 样本孔中加入待测样本50ul;空白孔不加。 |
步骤四: | 每孔加入生物素标记抗体50ul,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育30分钟;标准孔空白孔不加。 |
步骤五: | 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350ul),静置1分钟,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 |
步骤六: | 除去空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100ul,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育30分钟。 |
步骤七: | 重复步骤五 |
步骤八: | 每孔加入底物A、B各50ul,37℃避光孵育15分钟。 |
步骤九: | 每孔加入终止液50ul,15分钟内在450nm波长处测定各孔的OD值。 |
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