正确的处理样本是保证ELISA检测正确性和准确性的第一步。上海轩泽康为您简单介绍不同类型的样本的处理方法:
【血清】:用无热原无内毒素的试管或离心管采集血液标本。将试管或离心管室温放置两小时或4摄氏度过夜,使血清析出。**将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。4摄氏度1000g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20或-80摄氏度保存,避免反复冻融。采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP未标记的ELISA检测中会有非特异性的显色而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能会有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
【血浆】:用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30分钟内4摄氏度1000g离心15分钟,取上清。将上清分装多份-20或-80摄氏度保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本,常用的抗凝剂为EDTA,肝素钠等检测时还应仔细阅读试剂盒的说明。检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
【细胞培养上清】:取细胞培养上清到离心管,1000g离心20分钟,除去细胞碎片及杂质,取上清。-20或-80摄氏度保存,避免反复冻融。
小鼠碱性鞘磷脂磷酸二酯酶(AlkSmase) elisa试剂盒检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
3. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。