人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒 操作步骤:
1) 将标准品工作液依此加入到前两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔100ul.待测样品加入到其他孔,每孔100ul(若样本浓度高于检测范围,需要用标准品&样本稀释液稀释后取样)。给酶标板覆膜,37℃孵育90分钟。
2) 弃去液体,甩干,不用洗涤。每个孔中立即应加入生物素化抗体/抗原工作液100ul,混匀,酶标板加上覆膜,37℃孵育1小时。
3) 甩尽孔内液体,每孔加洗涤液350ul,浸泡1-2分钟,吸取或甩掉酶标板内的液体,再厚的吸水纸上拍干。如此重复洗板步骤3次。
4) 弃去孔内液体,洗板5次,方法步骤同3。
5) 每孔加底物溶液(TMB)90ul,混匀,加上覆膜,37℃避光孵育15分钟左右。
6) 每孔加终止液50ul,终止反应。
在实际操作中,除了挑选优良试剂外,有必要严厉依照操作过程进行操作,一起做好室内质控、室间质控,以严谨的工作作风检查每一份标本,才能确保检查质量。ELISA试剂盒如今国内已有适当数量的单位具有全自动酶标仪,这关于完成ELISA的规范化检查起到了重要作用。人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒 实验中遇到的问题上海轩泽康生物为您解答:
一.【洗板】可能造成的因素:a. 选用手工洗板,孔与孔之间液体穿插。b. 选用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,致使洗板不完全。洗板针阻塞抽吸不完全。洗板不畅致使洗板作用差。C.反响板过多形成洗板等待时刻长。
解决方法如下:1.确保洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后在吸水纸(挑选洁净、无尘或少尘的吸水资料)轻轻拍干。2.合理安排,或多用几台洗板机。
二.【显色】可能造成的因素:a.显色剂制造后放置时刻过长或运用过期显色剂。b.加显色剂时溅起孔外形成液体回流。
解决方法:1. 显色剂尽量在临用前制造,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不必。2. 加样时坚持显色剂不外流。 3. A、B液应防止触摸金属器械。